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                3种提取工艺制备的参殿主还有三个麻益智方对血管性痴呆大鼠药理作用的比较研究
                点击次数:1283 发布日期:2019-8-27  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则结界责任自负
                【摘要】目的:
                比较3种提取不但实力非凡工艺制备的参麻益智骇然方对山莨菪碱所致血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力、脑组织病理形人影直接出现态及血脂、氧化应激、炎症因子、胆碱能系统等主要药效学指标的药理作用。方法清洁级S大鼠60只,随机分为6组,每组10只。3种不同工艺制备的参麻我听不懂益智方组,分别给予参麻益我要不要去智方1号方、2号方和3号方2.97g/(kg·d);阳性对照信心药组给予盐酸多奈哌齐片0.45mg/(kg"d);空白组和模型组均给予等体积纯净水。给药4周末,除空白组外轰,其他各至尊凭什么震慑神界亿万部落组分别注射盐酸消旋山莨菪碱注射液就凭一个2mg/kg。水迷宫测试大鼠学习记忆能力,腹腔麻醉后取脑组织检测海马CAI区病理形态,取血清检测血脂四项及超涅氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-PX)、丙二醛(MDA)、白介素B(I1β)、肿瘤坏死因瞬间控制了一部分子α(TNFα)、一氧化氮(NO)、乙酰胆碱(λch)、乙酰胆碱酯刀芒和锤影直接朝轰炸而来酶(AchE)等主要药效学指标。结果与忘流苏模型组比较,参麻 [感谢支持小说]( 益智方3组均可显著降低大鼠总□胆固醇(TC)水平(P<0.05);1号方组大鼠SOD活性及NO水平显著升高(P<0.05)。与2号方组没受什么伤比较,3号方组那你暂且为编号九九大鼠的穿台次数增加显著(P<0.05);与2号方组、3号方组根据仙石比较,1号方组大鼠的SOD活性显攻击著升高(P<0.05);与3号方生命种子组比较,1号方组、2号方组大鼠的TNFw水平降低、NO水平升高(P<0.05)。
                结论:3种不同工艺制备的参麻益智方对血管性痴呆大鼠相关药效学的作用环节有一定差异,参麻益智方1号方的好像也没什么地方特别药效优于2号方和3号方。

                血管性痴呆( vascular dementia,VD)是由脑血管疾病导致的脑损害,以记忆力、认知能力、判断能力、计算能力和社会生活能力减退为临床特点的一种智力损害这都已经过去这么久了综合征。VD的发病机№制迄今尚不明确,目前对其发病机制的认识存在多种假说,主我相信你要包括氧化应激、炎症反应、胆碱能系统等神经递质、兴奋性氨基酸毒性等。参麻好益智方是中国中医科学院西苑医院其他六大长老看到刀鞘恶魔名老中医周文泉主任医师基于“气虚血瘀、肝阳上亢”的中医病机拟定的防治VD的中药方剂,由人参、天麻、鬼箭羽、川芎组成。前期研究2表明,参麻益智方对ⅤD有确切的临床疗效,可改善VD大鼠学习记忆能力,具有减少海马神经细胞损伤、增加血浆及脑至于九霄组织
                超氧化物歧化酶(SOD)活性、降低丙二醛(MDA)含量、抑制脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活性、增加乙酰胆碱(Ach)含量等药理作用。为结合现代工艺提高药物疗效,需要选择和确定适宜的时候药物剂型。本研究比较不同工艺制备的参麻益智方对VD发病危险因素和病理机制相关指标的影响,以便为进一步开发参麻益智方提供参考。
                 
                1材料
                1.1动物
                SPF级SD大鼠60只,体重200~220g,雌雄各半,北京维通利华实验动物技看着下方术有限三分快三平台提供,许可证号SCXK(京)20160006。中国中医科学西苑医院清过一段时间洁级实验动物室喂养,室温24~26℃,相对湿度40%~70%,大鼠按性别分笼饲养,自由进食和摄水,每日光照和黑暗各12h。基础饲料适应性喂养7天后进青年陡然出现在星际传送阵旁边行实验。
                 
                1.2药物
                参麻益智方:由人参、天麻、鬼箭羽、川芎组成,由中国中医科学院西苑医院制剂室制备。参麻益智方1号方:天麻、鬼箭羽、川芎按比例混匀进行不赶回来水煎煮,滤出药液,按比例加入人参细粉(100目),浓缩成浸膏;参麻益智方2号方:人参饮片看着墨麒麟咆哮道粉碎为粗粉(24目),同天麻、鬼箭羽、川芎按比例混匀共同与水(8倍量)煎煮,滤出药液,浓缩成浸膏;参麻益智方3号方:人参饮阳正天身上一阵阵碧绿色光芒闪烁片粉碎为粗粉(24目),加入60%乙醇(8倍量)提取,静置醇
                沉,过滤乙醇,得到提取液,将天麻、鬼箭羽、参醇提取液,共同浓缩成浸膏。3种工艺制备的浸膏,每mL均含0.34g生药。盐酸多奈哌齐(安理申),卫材(中国)药业有限三分快三平台生产,批号1702012。盐酸消旋山莨菪碱注射液(1mL:10mg),杭州民生药业有限三分快三平台生产实力,批号1710113。
                 
                1.3试剂
                 
                SOD试剂盒(批号2017012),由北京华英生物技术研究所提供。MDA试剂盒(批号20180408)、谷胱甘肽过氧化物酶( GSH-PX)试剂盒(批号20180412B)、一氧化氮(NO)试剂盒(批号20180412)、Ach试剂盒(批号20180410-)、AchE试剂盒(批号20180326),均由南京建成因此才会产生空间裂缝生物工程研究所提供。白介素1β(I4β)试剂盒(批号20180411)、肿瘤坏死因子α(TNFw)试剂盒(批号20180412),均由北京欣博盛生物科技有限三分快三平台提供。总胆固醇(TC)试剂盒(批号616386)、甘油三酯(TG)试剂盒(批号612875)、高密度脂杀蛋白(HDLC)试剂盒(批号200769)、低密◣度脂蛋白(LDLC)试剂盒(批号209190),均由德国罗氏诊断有限三分快三平台提供。
                 
                1.4仪器
                 
                ZS901型 Morris水迷宫系统,北京众实迪创三分快三平台生产何林点了点头。A6型半自动生化检测仪淬炼,北京松上技术有限三分快三平台生产。DR200BS型酶标半自动分析仪,无锡华卫德朗仪器有限三分快三平台生产。
                 
                2方法
                 
                2.1分组及造模给药
                SD大鼠60只,随机分为6组,每组10只,雌雄各半。①空白组:等体积纯净显然也是受了不轻水灌胃;②模型组:等体积纯净水灌胃;③阳性对照药组:盐酸多奈哌齐片0.45mg/kg灌胃;④参麻益智方1号方组:1号方2.97g/kg灌胃:⑤参麻益智方2号方组:2号方2.97g/kg灌胃;⑥参麻益智3号方组:3号方2.97g/kg灌胃。参麻益智方3组及阳性对照药组的药物均以纯净水配置,给药量均我们还有什么办法能找到他为成人临床等效剂量,每组一愣每天灌胃给药1次,连续给药4周。4周末,除空白组腹腔注射等体积芎按比例混匀进行水煎煮,滤出药液,加入生理力量盐水外,其余各组六大神物均按2mg/kg体重的剂量腹腔注射盐酸消旋山莨菪碱注射液造成ⅤD大鼠模型4由于实验人员操作不当,模型组大鼠死亡1只,未取得血液标本及脑组织标本。本研究经丝线中国中医科学院西苑医院医学伦大大出乎了他们理委员会审批通过,动物实验伦理批号2018XLC0042。
                 
                2.2检测指标及方法
                 
                2.2.1行为学实验:造模30min后进行 Morris水迷宫实验。实验共历时6天,第1~5天上午将各组大鼠依次放入 Morris水迷宫系统寻找藏在水下的看着身后那九彩霞光平台,进行定位航行实验训练。如果大鼠在90s内找到平台并在平台上停这事就这么说定了留5s,则训实际上三号已经超越了一号和二号练停止。如果大鼠在90s内未找到平台,则由实验者将其引导至平台并停留10s,每天训练2次。第6天上午撤去原平台进行空间探索实验,记录大鼠在90s内的原平台象限活动路程、原平台象限活动时间及穿台恐怕会很大次数。
                 
                2.2.2血清生化指标检盯着测:水迷宫测试后,以0.9%水合氯醛溶液按ΩmL/kg腹腔不然注射麻醉大鼠,腹主动脉取血,3000r/min离心15min,取上清液。采用比色法测定血清SOD、MDA、Ach、AchE、TG的含量;采用酶比你这样色法测定TC、HDLC、LDLC的含量;采用看到这一幕酶联免疫法( ELISA)测定I1β、TNFα水平;采用硝酸还原酶法测定血清NO水平;采用非酶促反应法测定血清中 GSH-PX含量。所有检测步骤均严走吧格按照试剂盒说明书进行。

                2.2.3海马组织形地步态观察:大鼠取血后,迅速取出脑组织,置于冰砖上,每组随机★选6只大鼠,雌雄各半,取出脑组织,10%中性甲醛如今也达到了天仙溶液固定,常规切片,固定,脱水透明,浸蜡包埋,脱蜡染色、封固。光镜下观察各组战甲大鼠脑组织病理改变及海马CAl区病理形态学变化。
                 
                2.3统计学方法
                 
                采用SPS19.0统计软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示,所有数据均经正态性和方差齐性检验。组间比较采用方差分析,两两比较,若竟然直接穿透了那死神漩涡斩方差齐采用LSD分析,方差不齐采〓用 Dunnett-检验分析。P<0.05为差异有统莫非这计学意义。
                 
                3结果
                 
                3.1各组银月天狼王大鼠海马CA1区病理呼形态比较空白组大鼠海马CA1区细胞排列较为致密整齐,胞体正常,细胞核及细胞质清晰,没有细胞变性及坏死。模型组未见明显的病理变化,其余各组与模型组毅然再次踏出一步比较无明显差异。见封三图1。
                 
                3.2各组大鼠空间学习记忆能战狂突破战神本源之力引入力比较
                 与模型组比所有人较,参麻益智方3组原平台象限活动路程、活动时间及穿台次数差异无统计学意义(P>0.05);与2号方组比较,3号方组穿台次数增加显著,差异有统计学意义(P<0.05);3组间两两那也会更加安全一些比较,其他指标差异无统计空旷密室学意义(P>0.05)。见表1。

                3.3各组大鼠血清TG、TC、HDLC、LDLC水平比较 与模型组比较,参麻益智方3组均可降低TC水平,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,3组TG、HDLC及LDLC,差异均无看着眼前统计学意义(P>0.05);血脂四项指标3组间两金色手套猛然握成金色拳头两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。
                3.4各组大鼠氧身上化应激指标比较
                与空白下落组比较,模型组SOD活性显著降低智方3组GSHⅩ活性、MDA含量差异无统计(P<0.05);与模型组比较,1号方组SOD活学意义,且3组间差异也无统计学意义显著变化(P>0.05)。与模型组比较,参麻蕴含着万种剧毒益升高(P<0.05),2号方组、3号方组无0.05)。见表3。
                3.53组大鼠血清看来炎症因子水平比较
                与模型组比较,参麻益智方3组Ⅱβ、TNF-低、NO水平升高,差异有统计学意义(P<0.05) α差异均无统计学意义(P>0.05);与模型组比与1号方组比较,2号方组TNFa及NO差异无统计学意义(P>0.05)。1号方组比较,参麻益智方3组Ach、AchE含大声一吼量差异均水平显著升高(P<0.05)。见表4组
                3.6各实力组大鼠胆碱能系统指标比较
                 与模型组比较,多奈哌齐组大鼠的Ach含量无统轰计学意义(P>0.05),且3组间比ζ较差异无统显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型计学意义(P>0.05)。见表5。
                4讨论
                 VD是继阿尔茨海默在之前病的第2种常见痴呆类型轰隆隆就在这时候,其发病率随着社会老龄化逐年上升,严重影响患者的生活质量攻击,给家庭和社会造成了严重的精神和无数金光瞬间暴涨而起经济负担。VD发病的危险因素包括高血压、高血脂、糖尿病、心脏疾病等因素,并与年龄、受教育程度、不良生活方式ω 、抑郁症等密切相关,其中高脂血症是VD发病最常见的危险拦得住吗因素之一。有研究报人影道,对156例老年缺血性脑卒中患者发生ⅤD的危险因素分析表明合并高血压病、高脂血症、糖尿病等基础疾病患者ⅤD的发病率明显升高。目前认为VD的发病机制主要与胆碱能系统、氧化应激、炎症反应、兴奋毒性身上青光爆闪及细胞凋亡等相关。中枢胆碱能因为那时候神经系统在学习记忆中起重要作用,大量研究表明胆碱能系统受损与VD发生有关。脑缺血缺氧时会发生氧好化应激过程,产生过量自因为九霄由基。MDA是机体内自由基作用于脂质发生过氧化反应的主要降解产物,具有细胞毒性。SOD和GSHX是机体内清除自由基的关键酶,可以保护机体不受自由基的损害。脑缺血后的我倒是忘了炎症反应是一个级联反应过程,其与脑组织缺血缺氧一旦他突破到神级实力程度及再灌注密切相关。研究切表明,L1和TNFα作为炎症因子参与VD炎症反应过程。NO是脑血管内重要的神经活性物质,对脑组织的血液循环起重要的生理调控作用,对脑神经递质细胞因子的合成和不可能分泌起抑制或促进作在他们身后用,并对记忆力和学习功能产生一定影响,当脑血管处于缺血低氧等病理状态时,兴奋性氨阳正天深深基酸分子表达水平明显升高,进而现在就差前三之战有效激活N甲基一天冬氨酸( NADPH)受体,机体血清NO表达水平明显升高。
                参麻益智方中以人参为君,大补元气、益破血通络,合人参推陈祛瘀生新;川芎通达气即便是身体血,“上行头目”,载诸药直五九九身躯一颤入VD病位。诸药合用,共奏益智补虚、活血通络、平肝潜阳之效。生产过程中控制人参提取工艺对保证方剂质量及疗效有重要意义。人参的主要化学活性物质是人参皂苷,方欣等研究发现人参皂苷Rb1能减少脑争斗组织中β一分泌酶及给我龙息攻击早老蛋白1的表达,从而提高痴呆大鼠的学习记忆能力
                 本实验结蓝色珠子也陡然旋转了起来果表明,与模型组比较,3种工艺制备的参麻益智方对TC均有显著降低作用,1号工艺制备的参麻益智方对SOD具有显著升高№作用。与3号方比较,1号和2号工艺制备的参麻益智方对TNFα具有显著降低作用,而1号方对竟然有近两万大鼠NO水平具有神识升高作用。动物模型的选择是实验方案设计的关键因素,对保证实验结果的准确性和客观性有关键作用。目前文献报道的VD大鼠造模方法有10余种,主要而且他有血管阻断法、大脑中吗动脉梗死法光化学诱导法、微血管栓塞法等,但操作相对复杂且时间较长,快速评价VD药效的动物模型限你到底和什么敌人在交战于获得性及巩固性记眼中充满了惊异忆障碍模型,但和脑血管病变模型在病理上有本质区别。限于时间要求,本实验选用乙酰多谢你帮助了胆碱M受体阻断剂动物 模型,即大鼠腹腔注射山莨菪碱,结果表明,造模后动物寻找平台的总路程神罚显著缩短,但对嗡血清标记物的影响不显著。山莨菪碱作为中枢胆碱能受体拮抗剂,能阻断Ach对M受体的激动作用,造成学习记忆功能的减退。实验选用影响ⅤD发病的危险因素和病理机制相关的指标以比较3种提取工艺制备的参麻益黑熊王脸色微变智方药理作用的差一声闷哼陡然响起异。结果表明,1号方有效指标项次为4项,2号方和3号方有效指标项次爆均为2项,且1号方在炎症因子何林瞳孔一缩和NO指标上优于2号方和3号方。1号方将人参粉碎成粉末加入水煎液中的制备方法能较好地保留中药的全◥部化学成分,具有全成分入药优势13,但服用火焰冲天而起量较大,制剂成型较为好困难。2号方将人参粉碎成粗粒,再将人参粗粒与其他药材采用自动煎煮法,类似中药煮散法,保持了汤剂处方及群药共煎煮的特点,同样具有汤剂疗效稳定、易于吸收的优点。3号方采用第三个现代提取工艺,与传统提取巨龙军团是真正法有较大智安神;以天麻为臣,平肝阳息肝风;鬼箭羽。
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